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接下來說的,熟悉白介素試劑盒的人都知道!

2020-05-27 瀏覽次數(shù):1631

       白介素試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,適用于體外定量檢測人血清、血漿、組織或細(xì)胞培養(yǎng)上清液中天然和重組的IL-2濃度。白介素2 (IL-2)主要由絲裂原或抗原激活的T淋巴細(xì)胞表達(dá)的。它在促進(jìn)抗原特異性增殖的T細(xì)胞克隆增殖中起重要作用。另外,IL-2也參與其他不同種類細(xì)胞的多個免疫反應(yīng)。IL-2刺激胸腺細(xì)胞增殖;刺激激活的B細(xì)胞增殖與分化;促進(jìn)單核細(xì)胞的生長、分化與細(xì)胞殺傷能力;誘導(dǎo)自然殺傷細(xì)胞的生長與刺激這些細(xì)胞的細(xì)胞因子表達(dá)以及細(xì)胞殺傷能力;增加淋巴激活殺傷細(xì)胞(LAK)的產(chǎn)生;誘導(dǎo)少突膠質(zhì)細(xì)胞的增殖與分化。人IL-2的cDNA編碼153個氨基酸糖蛋白前體包含20個氨基酸組成的信號肽,成熟時信號肽被剪切掉。在氨基酸水平序列上,小鼠IL-2與人IL-2的序列同源性達(dá)60%。人IL-2可以在小鼠細(xì)胞中活化,但是小鼠IL-2不能在人細(xì)胞中活化。IL-2基因定位在染色體4q位點。
  白介素試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白介素6(IL-6)水平。用純化的人白介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6),再與HRP標(biāo)記的白介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人白介素6(IL-6)濃度。
  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

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